1. cck8试剂盒多少钱
方法/步骤分步阅读
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先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。
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按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。
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接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。)
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在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃,5% CO2),向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数),将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
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用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
总结:
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1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度。
3、建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
注意事项
如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基。
当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
2. CCK—8试剂盒
CCK-8,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞 毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关 系。
3. cck8试剂盒哪家好用
一般2左右,十几的话是不是培养液中产生什么吸光色素之类的。 这个针对不同的菌种和不同的培养基均不同,需要自己前期做一个标准曲线。也就是用培养基为空白对照,不同生长阶段发酵液为样品测定OD值,并测定这些阶段的活菌数,此后再按照发酵时间对比标准曲线得出单位活菌数。
但是活菌的生长不完全稳定性和细菌的自然沉降都会影响实验结果,如果看趋势可以使用,如果要获得详细数据没办法还得活菌计数。
4. cck8试剂盒能放在常温吗
cck8在避光条件下,4℃可保存一年,常温下可保存九天!
5. cck8试剂盒说明
CCK8检测细胞增殖/毒性的原理
WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】属于MTT的升级产品,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。
CCK-8的优点:
使用方便快捷,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;CCK-8法的重复性优于MTT法;CCK-8法对细胞毒性小;CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。
CCK-8的缺点:
与MTT法相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。
6. cck8试剂盒说明书
cck8试剂加入后孵育时间,随着时间的增加,OD值就会增大。总之原则就是把OD值控制在1.0左右。
7. cck8多少钱一瓶
可以
CCK-8)试剂盒通过采用水溶性四唑盐WST-8 (化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)实现快速检测,其原理是WST-8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料(formazan)。
通过比色,可以动态地量化活细胞的数量,从而对细胞增殖或药物毒性进行检测。CCK-8溶液可直接加入到细胞中,不需要与其它组分预混,操作方便,检测准确。
CCK-8)是一种氧化还原反应的指示剂,在电子载体1-Methoxy PMS存在的条件下,利用活细胞中的脱氢酶催化四唑盐WST-8生成甲臜染料,而且甲臜染料的生成量与活细胞的数量成线性关系。
产品优势
CCK-8的检测灵敏度高于其他方法,如MTT,XTT或WST-1;
操作更简单,无需有机溶剂;
对细胞无毒性;
稳定的试剂,即开即用。