免疫沉淀试剂盒(免疫沉淀试剂盒哪个牌子好)

虚拟屋 2022-12-16 13:39 编辑:admin 282阅读

1. 免疫沉淀试剂盒哪个牌子好

生物碱试剂是指可以沉淀各类生物碱的化学试剂。生物碱沉淀剂的种类很多,常用的有以下几种:

1、碘化汞钾试剂:在酸性溶液中与生物碱反应生成白色或淡黄色沉淀。

2、碘化铋钾试剂:在酸性溶液中与生物碱反应生成桔红色沉淀。

3、碘化钾碘试剂:在酸性溶液中与生物碱反应生成棕红色沉淀。

4、硅钨酸试剂:在酸性溶液中与生物碱反应生成灰白色沉淀。

5、磷钼酸试剂:在中性或酸性溶液中与生物碱反应生成鲜黄色或棕黄色沉淀。

2. 免疫沉淀试剂盒图片

当然不能,从其定义就知道了。将抗原和抗体在琼脂凝胶孔中电泳,带负电荷的抗原向正极运动,带正电荷的抗体向负极运动,二者在琼脂凝胶中相互作用而形成沉淀线。放反的话,都跑到电泳槽中去了,溶解到buffer中了。

3. RNA免疫沉淀试剂盒

试验步骤:

1、 将0.5-1.0g寡聚(dT)-纤维悬浮于0.1M的NaOH溶液中。

2、 用DEPC处理的1ml注射器或适当的吸管,将寡聚(dT)-纤维素装柱0.5-1ml,用3倍柱床体积的DEPC H2O洗柱。

3、 使用1×上样缓冲液洗柱,直至洗出液pH值小于8.0。

4、 将RNA溶解于DEPC H2O中,在65℃中温育10min左右,冷却至室温后加入等体2×上样缓冲液,混匀后上柱,立即收集流出液。当RNA上样液全部进入柱床后,再用1×上样缓冲液洗柱,继续收集流出液。

5、 将所有流出液于65℃加热5min,冷却至室温后再次上柱,收集流出液。

6、 用5-10倍柱床体积的1×上样缓冲液洗柱,每管1ml分部收集,OD260测定RNA含量。前部分收集管中流出液的OD260值很高,其内含物为无Poly(A)尾的RNA。后部分收集管中流出液的OD260值很低或无吸收。

7、 用2-3倍柱容积的洗脱缓冲液洗脱Poly(A+)RNA,分部收集,每部分为1/3-1/2柱体积。

8、 OD260测定Poly(A+)RNA分布,合并含Poly(A+)RNA的收集管,加入1/10体积3M NaAc(pH5.2)、2.5倍体积的预冷无水乙醇,混匀,-20℃放置30min。

9、 4℃离心,10000g×15min,小心吸弃上清。用70%乙醇洗涤沉淀。[注意:此时Poly(A+)RNA的沉淀往往看不到]。4℃离心,10000g×5min,弃上清,室温晾干。

10、 用适量的DEPC H2O溶解RNA。 注意事项:

1、 整个实验过程必须防止Rnase的污染。

2、 步骤4中将RNA溶液置65℃中温育然后冷却至室温再上样的目的有两个,一个是破坏RNA的二级结构,尤其是mRNA Poly(A+)尾处的二级结构,使Poly(A+)尾充分暴露,从而提高Poly(A+)RNA的回收率;另一个目的是能解离mRNA与rRNA的结合,否则会导致rRNA的污染。所以此步骤不能省略。

3、 十二烷基肌氨酸钠盐在18℃以下溶解度下降,会阻碍柱内液体流动,若室温低于18℃最好用LiCl替代NaCl。

4、 寡聚(dT)-纤维素柱可在4℃贮存,反复使用。每次使用前应该依次用NaOH、灭菌 ddH2O、上样缓冲液洗柱。

5、 一般而言,107哺乳动物培养细胞能提取1-5μg Poly(A+)RNA,约相当于上柱总RNA量的1%-2%。

4. 免疫酶试剂盒

MLKL酶联免疫试剂盒该产品提供实验代测服务.

5. 免疫沉淀试剂盒使用方法

1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。

2. 防止非特异性的RNA的结合。

3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。

4.结合的RNA序列通过microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。

延伸阅读:95%的人类基因组并不编码基因,而是产生大量的非编码RNA,真正编码蛋白质的基因只占人类总基因组的约2%。这些非编码RNA在生命的生长发育的各个阶段都发挥着重要的调节作用,与艾滋病、白血病、糖尿病、畸形等多种病变密切相关,并且参与着干细胞和表观遗传学调控。

6. 染色质免疫共沉淀试剂盒

CHIPSeq的原理是:首先通过染色质免疫共沉淀技术(特异性地富集目的蛋白结合的片段,并对其进行纯化与文库构建;然后对富集得到的片段进行高通量测序。

研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段信息。

7. 免疫共沉淀 试剂盒

不一定。

对于沉淀的产生和溶解实质上有一个沉淀溶解平衡,沉淀溶解平衡是指在一定温度下难溶电解质晶体与溶解在溶液中的离子之间存在溶解和结晶的平衡,称作多项离子平衡,也称为沉淀溶解平衡。在一定温度下,难溶电解质饱和溶液中各离子浓度幂的乘积为一常数。严格地说, 应该用溶解平衡时各离子活度幂的乘积来表示。但由于难溶电解质的溶解度很小,溶液的浓度很稀。一般计算中,可用浓度代替活度。所以我们用溶度积Ksp来表示难溶电解质溶解能力的大小。当化学式所表示的组成中阴、阳离子个数比相同时, Ksp数值越大的难溶电解质在水中的溶解能力越强。对于一般的难溶电解质AmBn的沉淀溶解平衡 AmBn(s) ==== mAn+ + nBm- Ksp=c^m(An+)×c^n(Bm-) 显然沉淀是否完全和沉淀试剂的浓度有关,加入的沉淀试剂的离子浓度越大,沉淀越完全。

8. 免疫沉淀试剂盒怎么用

酶联免疫诊断试剂盒(上海科华的试剂盒)的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色。 另外,常用的底物还有:1)AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀 什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,  且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。  TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。  由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。  TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试  剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等  优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈  黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。  ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用。