1. PCR 试剂盒
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
2. PCR纯化试剂盒的试剂成分
不是的,PCR纯化试剂盒—是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用。
PCR凝胶试剂盒—是在PCR产物是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将你所要的条带位置的胶切下回收,后者的回收效率低,但是很纯净。古朵生物 纯化试剂盒
3. pcr全称英文 试剂盒
目前核酸检测试剂常见的国产种类有这几种:
一,杂交捕获免疫荧光法,保存温度:2-30℃;
二,乳胶法,保存温度:4-30℃;
三,酶联免疫法,保存温度:2-8℃;
四,胶体金法,保存温度:2-30℃;
五,荧光PCR法,保存温度:-205℃;
六,化学发光法,保存温度:2-8℃;
七,双扩增法,保存温度:A盒-40到-15℃,B盒2-8℃;
八,RNA捕获探针法,保存温度:A盒2-8℃,B盒低于-15℃;
九,荧光免疫层析法,保存温度:4-30℃;
十,磁微粒化学发光法,保存温度:2-8℃;
十一,稀土纳米荧光免疫层析法,保存温度:2-30℃;
十二,上转发光免疫层析法,保存温度:2-30℃。
4. pcr试剂盒是什么样子的
提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器,广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。PCR仪一般指基因扩增仪,要用于用于科研及临床的基因扩增、定性PCR基因扩增、荧光/酶免终点定量DNA基因扩增、基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增等。
PCR仪用于科研及临床的基因扩增,定性PCR基因扩增,荧光/酶免终点定量DNA基因扩增,基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增,适合国内外各种PCR试剂盒传染病类(各型肝炎病毒、结核杆菌、STD性传播疾病、优生优育、支原体、衣原体、寄生虫等)、肿瘤类(P53、幽门螺杆菌等)、科研类(遗传鉴定、细菌病毒分型等)。
5. pcr试剂盒的使用方法
PCR跑胶不亮说明PCR扩增效率低,需要找出原因并进行优化,获得高效扩增。
影响PCR扩增效率的因素很多,引物,模板,反应系统,聚合酶都有可能。目前一般实验室都采用PCR试剂盒,反应系统基本没有问题。
鉴于跑胶不亮判断是有扩增效率不高,因此可能是模板浓度过低或聚合酶活性偏低。建议提高模板浓度和酶的使用量。
6. pcr的试剂盒
我国主要的几种检测试剂盒都是基于RT-PCR原理。因为需要检测的病毒样本浓度有高有低,高的容易检测,低浓度就会漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因扩增很多倍,达到可以检测出来的浓度。基本操作如下:
01
收集咽拭子等病毒样本,通过试剂打碎保护病毒的蛋白质壳子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就没有了感染性,相对安全一些。
02
由于这次新冠肺炎是单链RNA病毒,所以要先转换成cDNA。这个可以类比像是视频文件,mp4,rmvb,avi这些都是常见格式,同一个视频不同格式,意思都一样,可以互相转换。
03
常规PCR反应,加热到94℃把DNA拉链拉开,之后再55℃-60℃让引物,就是拉链扣分别套在两条拉链上,再升温到72℃让拉链自己复制,用左拉链做模板造一个右拉链,用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环,RNA数量翻一倍。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的病毒这个时候也显现出来了。
7. pcr试剂盒是什么意思
pCR中的lC是指试剂盒的内标。
“新型冠状病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)”,试剂盒采用的内标(IC)为人类RNaseP基因(RP)。
在实验工作中,经常出现内标扩增曲线不出现典型“S”型或者内标完全无扩增曲线的情况,导致重复检测,拖延了报告发放时间,给临床诊疗工作带来不便。
在经过一系列实验之后,对试剂盒说明书中给出的实验方法进行了部分更改优化,经优化实验步骤后,内标的扩增曲线及起始循环Ct值均有明显改善。