1. 化学试剂对微生物的作用
微生物生长所需要的营养物质主要有哪些
微生物的营养物质有六大类要素,即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源.
1. 水
水是微生物的重要组成部分,在代谢中占有重要地位.水在细胞中有两种存在形式:结合水和游离水.结合水与溶质或其他分子结合在一起,很难加以利用.游离水(或称为非结合水)则可以被微生物利用.
2. 碳源
碳在细胞的干物质中约占50%,所以微生物对碳的需求最大.凡是作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质,称为碳源.
作为微生物营养的碳源物质种类很多,从简单的无机物(CO2、碳酸盐)到复杂的有机含碳化合物(糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等).但不同微生物利用碳源的能力不同,假单孢菌属可利用90种以上的碳源,甲烷氧化菌仅利用两种有机物:甲烷和甲醇,某些纤维素分解菌只能利用纤维素.
大多数微生物是异养型,以有机化合物为碳源.能够利用的碳源种类很多,其中糖类是最好的碳源.
异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应,最终用于构成细胞物质,或为机体提供生理活动所需的能量.所以,碳源往往也是能源物质.
自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源.CO2是被彻底氧化的物质,其转化成细胞成分是一个还原过程.因此,这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量.这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质.
3. 氮源
凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质,称为氮源.细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧.氮是组成核酸和蛋白质的重要元素,氮对微生物的生长发育有着重要作用.从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用,而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大.
固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质,也能利用无机氮和有机氮化物,但在这种情况下,它们便失去了固氮能力.此外,有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用.
许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮,一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源.硝酸盐必须先还原为NH+4后,才能用于生物合成.以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐,但它们并不都能利用硝酸盐.
有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等,工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源.有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降解产物.
氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料,不作为能源.只有少数细菌,如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源.
4. 无机盐
无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质.其主要功能是:
① 构成细胞的组成成分;
② 作为酶的组成成分;
③ 维持酶的活性;
④ 调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位;
⑤ 作为某些自氧菌的能源.
磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成,并与能量转移、细胞透性调节功能有关.微生物对它们的需求量较大(10-4~10-3 mol/L),称为“宏量元素”.没有它们,微生物就无法生长.铁、锰、铜、钴、锌、钼等盐一般是酶的辅因子,需求量不大(10-8~10-6 mol/L),所以,称为“微量元素”.不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同.铁元素介于宏量和微量元素之间.
在配制培养基时,可通过添加有关化学试剂来补充宏量元素,其中首选是K2HPO4和MgSO4,它们可提供需要量很大的元素:K、P、S和Mg.微量元素在一些化学试剂、天然水和天然培养基组分中都以杂质等状态存在,在玻璃器皿等实验用品上也有少量存在,所以,不必另行加入.
5. 生长因子
一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基中培养不能生长或生长较差.当在培养基中加入某些组织(或细胞)提取液时,这些微生物就生长良好,说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养因子,这些因子称为生长因子.
生长因子可定义为:某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成,需要额外少量加入才能满足需要的有机物质,包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物,有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分%A
2. 微生物实验常用试剂
美兰溶液的配制:称取分析纯美蓝4.9ml,在100ml定容瓶内加部分蒸馏水使之全部溶解 后定容至100ml,塞上瓶盖,于冰箱中贮存备用,
3. 化验微生物都用什么化学试剂
耗材啊,化学试剂,ph试纸,移液枪枪头,离心管,载玻片和盖玻片。
4. 化学药剂对微生物的影响实验
定义 chemical agent 化学药剂指对细菌有抑制作用的药剂(对细菌生长有利的药剂被归于营养物)。 所以,化学药剂并不能明确的说是指什么,它有很多种。 按其作用 化学药剂可以抑制或杀死微生物,因而被用于微生物生长的控制。依作用性质可将化学药剂分杀菌剂和抑菌剂;杀菌剂是能破坏细菌代谢机能并有致死作用的化学药剂,如重金属离子和某些强氧化剂等。抑菌剂并不破坏细菌的原生质,而只是阻抑新细胞物质的合成,使细菌不能增殖,如磺胺类及抗生素等。化学杀菌剂主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和周围环境中的微生物。抑菌剂常用于机体表面,如皮肤、黏膜、伤口等处防止感染,也有的用于食品、饮料、药品的防腐作用。杀菌剂和抑菌剂之间的界线有时并不很严格,如高浓度的石碳酸(3%-5%)用于器皿表面消毒杀菌,而低浓度的石碳酸(0.5%)则用于生物制品的防腐抑菌。理想的化学杀菌剂和抑菌剂应当是作用快、效力高但对组织损伤小,穿透性强但腐蚀小,配制方便且稳定,价格低廉易生产,并且无异味。但真正完全符合上述要求的化学药剂很少,我们要根据具体需要尽可能选择那些具有较多优良性状的化学药剂。
5. 化学试剂对微生物的作用是什么
方法较多,方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。
1、化学灭菌法是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法。对微生物具有杀灭作用的化学药品称为杀菌剂,可分为气体灭菌剂和液体灭菌剂。杀菌剂仅对微生物繁殖体有效,不能杀灭芽孢。化学杀菌剂的杀灭效果主要取决于微生物的种类与数量,物体表面的光洁度或多孔性以及杀菌剂的性质等。化学灭菌的目的在于减少微生物的数目,以控制一定的无菌状态。
2、干热灭菌法是指在干燥环境(如火焰或干热空气)进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。适用于干燥粉末、凡士林、油脂等。
3、过滤除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去,以达到无菌目的。所用的器具是含有微小孔径的滤菌器。主要用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气的除菌。常用的滤菌器有薄膜滤菌器(0.45μm和0.22μm孔径)、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器、烧结玻璃滤菌器等。扩展资料:重复使用的诊疗器械、器具和物品,使用后应先清洁,再进行消毒或灭菌。被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品,应执行WS/T 367第11章的规定。耐热、耐湿的手术器械,应首选压力蒸汽灭菌,不应采取化学消毒剂浸泡灭菌。环境与物体表面,一般情况下先清洁,再消毒;当受到患者血液、体液等污染时,先去除污染物,再清洁与消毒。医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范,并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。
6. 微生物试剂属于化学试剂么
常规微生物实验室配置:
1, 培养箱:2~3台(细菌、霉菌、致病菌)
2, 电子秤:1台
3, 均质器:1台
4, 菌落计数器:1台
5, 微波炉:1台
6, 高压灭菌锅:1~2台
7, 加样器:2个
8, 冰箱:2台
9, 酒精灯:5~10个
10, 试管架:20~30个
11, 500ml三角瓶:50~100个
12, 量筒:(250ml 2个,500ml 2个,1000ml 2个)
13, 玻璃试管:500~1000支
14, 灭菌吸管:1ml,10ml各根据日用量而定
15, 凉干架:1~2个
16, 剪刀,镊子:各40~60个
17, 脱脂棉,纱布
18, 试管筐:10~20个
19, 无菌采样及称样袋:根据日用量而定
7. 化学试剂对微生物的作用是
发酵过程中采用的灭菌方法、原理和条件采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,成为灭菌。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌 。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。
微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件,也是食品工业和医药领域中必需的技术。方法概述灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。
可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌。
热灭菌法热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。
干热灭菌火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法(dryheatsterilization)。
把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内,在150~170℃下维持1~2小时后,可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的。
灼烧(incineration或combustion)是一种最彻底的干热灭菌法,应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。
湿热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌。
巴氏消毒法:因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒,故名。
这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法[1] 。巴氏灭菌法就是湿热灭菌,此法有两种方式[1] ,①经典的低温维持法(lowtemperatureholdingmethod,LTH):在61.7~62.8℃下处理30分钟;②较现代的高温瞬时法(hightemperatureshorttime或flushpoint,HTST):在71.6℃或略高温度下处理15分钟。在上述诸法中,以蒸气加压灭菌效果最好,可用常压蒸气灭菌,也可在高压蒸气锅中(一般使用1千克/厘米2)灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死。
但对某些易被高压破坏的物质,如某些糖或有机含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15~30分钟。
煮沸消毒法:采用在100℃下煮沸数分钟的方法,一般用于饮用水的消毒[1] 。
间歇灭菌间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。
此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。
一般是在正常大气压下用蒸气灭菌 1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏,而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死,从而达到彻底灭菌的目的。
辐射灭菌辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线,其他还有电离辐射(射线加快中子等)。
波长在25000~80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。
辐射灭菌法仅限于某一定材料,因所需设备复杂,难于广泛使用。渗透压灭菌渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法。
在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离,不能进行正常的新陈代谢,结果导致微生物的死亡。化学试剂灭菌大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。
常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性,以便清除灭菌后材料上残余的药物。化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物(磺胺类等)、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物,他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物(包括病原菌,病毒,癌细胞等)的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂。
8. 微生物试剂有哪些
关键生物试剂有很多,罗列一部分如下:
1.斐林试剂:用于检测还原糖;
2.双缩脲试剂:用于检测蛋白质或者多肽;
3.苏丹试剂:用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色;
4.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红;
5.二苯胺:用于鉴定DNA。在沸水浴的条件下,DNA 遇二苯胺会被染成蓝色;
6.班氏试剂:作用及检测原理与斐林试剂相似,但班氏试剂可长期使用;
7.甲基绿和吡罗红:甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色;
8.健那绿:检测线粒体,专一性让线粒染色呈蓝绿色,而细胞质接近无色活体染剂;
9.龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色;
10.改良苯酚品红染液:检测染色体;
11.溴麝香草酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄;
12.酸性重铬酸钾溶液:检测酒精,橙色变为灰绿色。
13.二氧化硅:在色素的提取的分离实中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分;
14.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止色素受破坏。用于提取叶绿体中的色素;
15.层析液:可用于色素的层析。
9. 化学试剂对微生物的作用实验报告
不同的细菌具有不同的代谢类型,从而与各种试剂表现出不同的反应,以此来 初步检验一些常见类型的细菌种类。细菌和其他生物一样,具有一定的化学组成和物理性状。细菌在新陈代谢过程中进行着各种生物化学反应。因细菌的种类不同。
催化这些反应的酶类及其活性也都有所差异,代谢过程中所产生的代谢产物亦各不相同。为此,利用生物化学的方法测定细菌在新陈代谢过程中所产生的代谢产物以鉴定细菌的种类,称为细菌的生化反应。
10. 化学试剂对微生物的影响
做细胞转染后仅六个小时,发现培养皿整个的非常浑浊,肉眼看有点像有白色沉淀,镜下已经看不到细胞,非常污浊,看不清楚。请教这是什么东西啊,我估计是我的质粒污染了,如何去除质粒中的污染啊,转染之前我用乙醇沉淀过的。请大家帮忙,谢了!质粒污染就是蛋白质和RNA还有基因组DNA的污染。蛋白质污染可以用酚氯仿重新来抽提,RNA污染可以用RNA酶去除RNA,基因组 DNA污染可以在质粒抽提时注意点就可以避免了,不好去除基因组DNA,要么就胶回收来去除DNA.如果时手工法提的质粒,建议换试剂盒来提,这些都可以避免的。1.估计培养皿的"浑浊"现象是细菌.
2.如果是质粒污染的话,电泳就能检测出来.
3.把你提取的质粒过柱子就可以啦.混浊是细菌污染,菌长的多的时候摇晃一下培养皿,会看到类似白烟的东西,镜下一看都是细菌。
一般质粒提取最后的时候注意一下,用灭菌水和无菌的EP管,管口过火,质粒提取后如果要检样,用无菌枪头。转染完成之后,换培养液的时候要加双抗的培养液。
注意这些一般不会有问题。