1. 阳性对照室的要求
对照分为两种,即阴性对照和阳性对照。
阴性对照不加模板,为了验证PCR体系是否污染;阳性对照是为了验证整个PCR体系是否正确以及扩增效率如何。
2. 阳性对照室D级可以吗
指Rh血型阳性,含有D抗原的就是Rh阳性,不含有D抗原的就是Rh阴性,Rh血型是根据红细胞膜上是否含有的D抗原来命名的。Rh血型是不同于ABO血型的独立的血型系统,并且Rh血型系统在临床上广泛应用。
3. 阳性对照室的净化要求
我来补充 污染区,半清洁区,清洁区 水处理,配液室,处置室,库房,医护办公室;接诊区,更衣室,治疗区,污物间 更衣室有病员更衣室和医护更衣室,然后病人等候区; 库房分湿库房(透析液存放)和干库房 复用间 治疗区严格区分阳性和普通治疗。
4. 阳性对照室是负压房间
一、病例发现报告
核酸检测实验室发现核酸检测阳性结果后,立即同时向疫情 防控指挥部、 医疗机构相关职能部门和院领导报告。 同步了解病 例基本情况、是否仍在医院内。
若阳性病例仍在医院内,重新采样、复核;若阳性病例不在医院内,报疾控部门安排属地追阳、采样和检测复核, 医院追踪检测结果。
二、应急处置 (一隔二控四摸排五同时)
( 一 ) 隔离转运感染者。立即将新冠病毒阳性感染者就地隔 离或转运至隔离病房,指导患者正确进行个人防护,非抢救生命 等特殊医疗救治需要禁止离开隔离区域。请示辖区新冠肺炎疫情 防控指挥部后, 由负压救护车将新冠病毒阳性感染者转运至新冠 肺炎定点医院接受进一步诊疗。
( 二 ) 封控区域、管控人员。 一是辖区卫生健康行政部门第 一时间组织院感、流调等专家赶赴现场,根据感染者活动轨迹等 情况分析评估,指导医疗机构精准划定门急诊和住院病区具体封 控范围。 二是根据门急诊和住院病区具体封控范围,就地做好所 有未离开封控范围人员的隔离管控。对已经离开医院的重点人员, 要第一时间报告辖区疾控中心。
划定封控范围前,除紧急诊断、治疗外,全院区域就地静止,暂停人员流动和物资流通。
( 三 ) 四类摸排。 门诊部查实出诊情况;保卫部门追溯感染者活动轨迹;信息科收集敏感时段就诊人员相关信息;科室调查 相关人员院内行动路径。
通过查看、记录敏感时段监控录像,调取扫码、缴费等相关 信息,掌握感染者在医院内活动路线、停留位置、停留时间、 防 护等情况;感染者近距离接触人员名单和个人防护情况;其他人 员在敏感区域出现、停留和行动路线情况。立即通知相关人员及 其家属,就地隔离,等待进一步通知或疾控中心流调、隔离安排。
( 四 ) 同时开展五项工作。
1、环境管控和终末消毒。相关区域停止使用空调通风系统。 依次进行环境、物品表面核酸采样,潜在污染环境、物品彻底终 末消杀和空调通风系统消毒清洗,再次采样、检测。
2、区域核酸检测。检测要确保区域,建议双采单检,优先检 测封控区域内人员。
3、封控区域接续诊疗和人员转运。
密接、次密接:病情不允许出院的住院患者,闭环转运至“ 一 点两区”救治医院;需要住院治疗的门诊就诊患者, 闭环转运至 “ 一点两区”救治医院;病情不允许转运的住院患者,在医院隔 离病房单人单间 ( 必须具备独立洗手间) 继续治疗;病情符合出 院标准的住院患者, 出院转集中隔离点;工作人员、不需要住院 治疗的门诊就诊患者和各类陪人,转集中隔离点。
一般接触人员:人事部门做好通知传达及管理,按照要求落 实居家隔离和核酸检测。
其他工作人员: 医院、家庭两点一线正常上下班,不乘坐公 共交通工具,加强健康监测。根据疫情形势,需要时确定驻地隔 离酒店, 医院、隔离酒店两点一线闭环管理。
4、综合评判医院感染风险。结合两次环境、物表核酸检测结果,讨论提出医院部分区域或全院 “正常开诊”或 “停诊”建议 后, 向属地卫生健康行政部门报告同意后执行。
5、做好信息发布。
5. 阳性对照室管理规程
简单的沉降用普通培养基平板测试就好,开盖暴露30分钟多点取样,30度培养4天洁净度监测用Millipore取样器,取样量为250升空气,结果乘以4即为1立方米空气的菌落总数。
准备室、阳性对照室和无菌室要分开,最好每个房间都装空间紫外灯,包括缓冲间。
6. 阳性对照室需要有哪些东西
1、建立样品准备区
这个区域专门用作样品的准备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施:⑴PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。⑵组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理,以根据应用的需要提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。⑷DNA样品应该用有专门的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。
2、样品准备和RNA-PCR RNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。
3、建立前PCR区。
该去专门用于准备各种反应,这个区域必须保持干净,而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。
4、PCR实验室试剂的操作。
⑴所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。⑵所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水,用0.22μm过滤的,并且是高压灭菌。⑶在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂,在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。⑷所用试剂都应该以大体积配制,实验一下看试剂是否满意,然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。⑸所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。⑹新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。⑺样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。
5、在前PCR区建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃,在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。⑵如果你的实验室使用多套引物,以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济,可以考虑分装保存够一天的PCR成分。⑶作为一个规则,应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且,你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。⑷阴性样品要与每组样品同时做,以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染,阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。⑸当做阳性对照时,有两个理由决定了应该使用最少数量的核酸。⑹由于必须有对照反应,对照模板的特点应该予以考虑。
6、控制污染的方法。
已设计出很有力的酶学方法用来消除一种形式的污染—使用UNG,这一技术能有效地消除由PCR产物引起的污染。另一种控制污染的方法是使用紫外线,这种方法不能完全消除污染问题,但可以将污染降低几个数量级。
7、后PCR区PCR完成以后,需要分析样品并解释数据,应该留出一个专门用于反应后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必须是专门用于这一目的,决不能把实验室这一区域的试剂或仪器用于任何前PCR活动
7. 阳性对照室做什么实验
二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型.按照《中华人民共和国医药行业标 准YY0569-2005生物安全柜》中的规定,二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4 个级别:A1 型,A2 型,B1 型和B2 型.所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护. A1 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s.70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口过滤排出. A2 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s.70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口过滤排出. 二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜.连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源,目的在断电下仍可保持安全柜负压,以免危险气体泄漏如实验室.其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm). B1 型70%气体通过排气口HEPA 过滤器排除,30%的气体通过供气口HEPA 过滤器再循环至工作区. B2 型为100%全排型安全柜,无内部循环气流,可同时提供生物性和化学性的安全控制,可以操作挥发性化学品和挥发性核放射物作为添加剂的微生物实验.