自动记录微生物总数仪器(微生物计数的详细操作)

虚拟屋 2022-12-15 12:14 编辑:admin 211阅读

1. 微生物计数的详细操作

微生物计数方法

1.血细胞计数法

2.稀释涂布平板法

3.滤膜法

4.比浊法

5.显微镜直接计数法

拓展资料

个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌和少数藻类等。(但有些微生物是肉眼可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”,但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等,按照细胞结构分类分为原核微生物和真核微生物。

微生物包括:细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,与人类关系密切。涵盖了有益跟有害的众多种类,广泛涉及食品、医药、工农业、环保、体育等诸多领域。

【参考资料】

来自头条百科:

https://www.baike.com/wiki/%E5%BE%AE%E7%94%9F%E7%89%A9?search_id=2n3pgsi9i70000&prd=search_sug&view_id=3fe36cid254000

2. 微生物常用计数方法

GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数本标准代替GB 4789.3-2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》、GB/T 4789.32-2002《食品卫生微生物学检验 大肠菌群的快速检测》和SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。

3. 微生物计数的方法

1.筛选菌株的原理

选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。

微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,只有能够利用尿素的微生物才能够生长;把纤维素作为培养基中的唯一碳源,只有能够利用纤维素的微生物才能够生长;在无氮源的培养基上,只有自生固氮菌才能够生长。

2.统计菌落数目的方法

(1)显微镜直接计数法(抽样检测法或血球板计数法)

原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。

方法:用计数板计算。

缺点:不能区分死菌与活菌。

(2)间接计数法(活菌计数法)

原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

4. 微生物计数的常用方法

微生物计数方法:

血细胞计数法

将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数。

①此法的缺点是不能区分死菌和活菌。

②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数。

③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化

5. 微生物计数的详细操作图画法

划线的目的就是将菌落通过涂抹的方式分散开,除第一次为沾取外,往后每次都连接上次末端继续划线,就是因为末端菌密度小,将密度最小处连续分散,因此经过几轮划线后便可获得单个菌落

6. 微生物计数的详细操作方法

1.MPN法

  MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。待测样品经系列稀释并培养后,根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度,应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。MPN法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数。

  2.平板计数法

  大肠菌群在固体培养基中发酵乳糖产酸,在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色,带有或不带有沉淀环的菌落。平板计数法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。

7. 微生物计数的详细操作流程

菌落总数检测一般步骤为:

采样 — 样品制备与稀释 — 倒平板 — 涂布平板 — 倒置培养 — 菌落计数 — 计算菌落总数

样品制备,需要对样品进行均质,根据客户需要检测的样品不同。WIGGENS提供不同的均质设备,如均质机,拍打式均质器等;

样品的稀释,国标中采用1:10的十倍稀释方法,SOCOREX提供各种手动精密移液器,瓶口分液器,移液管控制器为液体操作提供了保证。

倒平板,使用的培养基为含有琼脂的固体培养基。培养基在配备的过程中需要经过煮沸和保温的步骤。WIGGENS红外加热磁力搅拌器,直接使用红外辐射方式进行加热,1L培养基只需要10分钟即可煮沸,极大节约了客户培养基制备时间。在倒平板之前,需要恒温培养基46±1 ℃, WIGGENS恒温水浴锅,可以为用户提供的温度控制和恒温条件;

涂布平板,培养基在培养皿中冷却成固态之后,将稀释后的样品用移液器取1mL,滴到培养基表面,用涂布棒涂匀。WIGGENS有专用的培养皿转盘,可以有效的将样品液均匀的涂布在培养基表面。

倒置培养,将涂布完毕的平板,放入恒温培养箱中进行培养,一般培养时间约为48h。WIGGENS恒温培养箱内容积50-140L各种规格的台式及落地式培养箱,先进的设计及数据接口,可以直接通过电脑编程控制及信息处理,非常适合规范化培养要求。

菌落数计算,经过48小时的培养之后,在培养基表面会长出菌斑,每个菌斑代表一个微生物。一般在培养皿中菌落数为30-300个之间,为有效菌落数。低于30个,会因为样本量不足,随机性大;超过300个,会因为菌落数太多,过于密集产生菌斑重叠等现象,不利于准确计数。WIGGENS菌落计数器,是带有非闪烁式环形光源,放大镜,压力传感器,计数笔等,可以让使用者轻松计数。

计算菌落总数,培养皿中的菌落数需要通过公式换算。 WIGGENS菌落计数器,配套软件可以直接通过压力传感器进行培养皿中菌落计数,通过软件内嵌程序直接计算出被检测样品中菌落总数。

8. 常用微生物计数方法

因为一个菌落是由一个细菌繁殖而来的子细胞群体,所以可以通过菌落数计算样品的微生物数量。

9. 对微生物进行计数的方法

菌落计数时应选取菌落数在30~300之间的平板,若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,!比值大于2则其较小数字。菌落主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志。