培养基分装仪器(培养基分装到培养皿)

虚拟屋 2022-12-15 16:37 编辑:admin 230阅读

1. 培养基分装到培养皿

在培养皿里灭菌,培养基会沸腾残留在整个平皿,影响平皿的观察,还有很多培养基是需要加入抗生素的,高温会失活

2. 培养基分装培养皿、试管斜面和三角瓶时的注意事项

根据经验回答,不一定是正确答案。大致有两个原因:

1.最主要原因就是盖子大而底小,如果正面放置,取用时很容易只拿到盖子,造成平皿的暴露,可能会产生污染或者平皿掉落等情况。

2.一般新配置或者从冰箱拿出来不久的培养基,通常会比较潮湿,盖子上往往会凝集不少水汽,如果在接种平板后正置于培养箱内,盖子上的水汽会滴落于培养基表面,形成一大片菌苔,对于一些要求看到单菌落的实验(如四区划线等),就无法看到应有的实验结果了。需要说明的是,上述操作不是严谨的操作流程,一般来说新配置的培养基是需要放在37℃烘箱里过夜,一方面查看培养基在配制过程中是否造成污染,另一方面也是使培养皿的水汽得以蒸发,以便后续使用。

3. 培养基倒入培养皿

固体培养基液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。

固体培养基倒板

1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉

2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。

4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。

4. 培养基分装到培养皿后进行灭菌

培养基的灭菌方法

1、高压蒸汽灭菌:

高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。 灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。

2、过滤灭菌:

一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。

扩展资料:培养基有哪些种类

培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型。按纯度 合成培养基 是指原料其化学成分明确、稳定的培养基。适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律,但是培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产。 天然培养基 这一类培养基采用天然的原料,所以其原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业。然而原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。按状态 固体培养基 适合于菌种和孢子的培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类,如香菇、白木耳等的生产。 半固体培养基 在配好的液体培养基中加入少量的琼脂,一般用量为0.5%~0.8%,主要用于微生物的鉴定。 液体培养基 80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基。按用途 培养基按其用途可分为孢子(斜面)培养基、种子培养基和发酵培养基三种。

5. 培养基分装到培养皿里

包上报纸或者保鲜袋就是为了防止你灭完菌后从高压灭菌锅里拿出来时

接触到外面的空气或者污染的手啊等等造成再次污染

一般做组培时如果是用培养皿的话

是和培养基分开来灭的

培养皿用报纸包好后灭完取出来,一般要放到烘箱中干燥,去除蒸汽凝结的水

如果图省事的话,灭完后直接拿出来扔超净台里

培养基在灭菌的过程中本身就会消耗掉一部分水分

培养皿中的残留水分不会对培养基浓度造成影响

建议培养皿灭好后,有条件的话还是放在烘箱中烘干

当然不需要打开报纸,直接包着报纸干燥就行了

如果培养皿有较多水分的话,倒培养基前先在超净台里甩一下

尽量去除残留的水分

切忌在你打开报纸包装时一定要在超净台里

取出灭好的培养皿之前一定双手一定要消毒

6. 培养基分装到培养皿后再进行湿热灭菌

培养皿灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌,干热灭菌方法:包在铁质容器内,进行高温烘烤。湿热用牛皮纸包起来放在高压锅中进行高压灭菌。

培养基灭菌方法有湿热灭菌、煮沸灭菌和过滤除菌,煮沸灭菌在电磁炉或者微波炉内进行煮沸即可,过滤除菌适用于不能高温处理的培养。

7. 培养基分装到培养皿后再进行高压蒸汽

一次性培养皿不可以高压灭菌

培养皿可以高压蒸汽灭菌。只是培养基一般是液体,灭菌只能湿热。 倒入培养皿灭菌不是容易洒出来

一次性培养皿一般为塑料材质,用射线灭菌。反复使用的皿一般为玻璃材质。清洗后进行干热灭菌(180℃,3小时)。

培养基一般采取湿热灭菌(121℃,20分钟)的方法,若是体积较小或者有其它特别要求的话,也可以过滤除菌

8. 培养基分装到培养皿上

融化培养基 将装有伊红美蓝琼脂培养基的三角瓶放入热水浴中加热至沸,直至充分融化。

2.

倒平板 待培养基冷却至50℃左右后,按无菌操作法倒平板(每皿约倒15ml),平置,待凝。 操作方法: 右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边,用右手手掌和小指将瓶塞轻轻地拨出,瓶口保持对着火焰; 然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一条稍大于瓶口的缝隙,迅速倒入培养基约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。

3.

作分区标志(操作熟练后此步骤可省略) 在皿底用记号划分成4个不同面积的区域,使A

4.

划线操作 1)挑取菌样: 选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量含菌试样。

9. 用培养皿制作培养基的过程

1、称量好培养基的各个成分,如果是商品化的干粉培养基则按说明称取。

2、加入足量的水,溶解混匀,必要时调节PH值。

3、如果有必要,可进行分装。

4、灭菌,一般来说,含糖培养基115℃20min,不含糖培养基121℃20min

5、如果是配置平皿培养基,则趁凝固前倾注平皿。

10. 培养基分装到培养皿注意事项

错误。培养皿和培养基都需要先灭好菌,然后待培养基冷却到50℃左右再倒培养皿。

11. 培养基分装到培养皿后用高压蒸汽灭菌法灭菌

要根据你的培养基成分来选择灭菌方式。

1.如果你的培养基中所有的成分都可以耐高温,那就用压力蒸汽高温灭菌的方式:121℃或者115℃30分钟。

2.如果你的培养基中有些成分不耐高温,就可以用除菌过滤的方式除菌:用除菌滤器过滤培养基至已灭菌的培养器中。

3.如何要求不高,部分试验用培养基,可以用煮沸的方式灭菌。不知你是哪种培养基。